تجربة تحضير بيئة الآجار المغذي والمرق المغذي عملياً , Preparation of nutrient agar and nutrient broth

تمهيـد :

من أهم البيئات الغذائية المستخدمة لتنمية الكائنات الدقيقة مرق البويون المغذي السائلة وبيئة المرق المغذي والآجار المغذي المحتوية على مستخلص اللحم والخميرة و الببتون والتي لها طرق معينة لتحضيرها ولكن لن نقوم بذكرها نظراً لتوفر هذه المواد بسهولة من خلال تحضير بعض الشركات لها على شكل مسحوق يضاف له الماء عند الإستخدام وكذلك فهي تستغرق وقتا طويلا في تحضيره .
ولكن هذه المواد بالإضافة للمكونات الأخرى لهذه البيئات توفر العناصر والمواد اللازمة لنمو الميكروبات المنماة عليها بصورة جيدة . ويمكنك أخي الطالب مراجعة الملحق للتعرف على مكونات بعض الأوساط الغذائية المهمة والمستخدمة بكثرة في الفحوصات الميكروبية في مختلف المجالات .

مكونات بيئة الآجار المغذي :
1- ببتون peptone 6 جم/ل
2- مستخلص خميرة yeast extract 2 جم/ل
3- مستخلص لحم Beef extract 1 جم/ل
4- كلوريد الصوديوم sodium chloride 0.5 جم /ل
5- آجار agar 14 جم/ل
تذاب هذه المواد في لتر ماء مقطر.

مكونات بيئة المرق المغذي :
1- ببتون Peptone 5 جم/ل
2- مستخلص لحم Beef extract 3 جم/ل
3- قد يضاف كلوريد الصوديوم Sodium chloride 0.5 جم/ل
تذاب هذه الكميات في لتر من الماء المقطر مع مراعاة أن يكون الph 7.2 .

المواد والأدوات اللازمة :
ميزان الكتروني- دوارق مخروطية سعة 500 ملل – أنابيب اختبار – مخبار مدرج – ماء مقطر- لهب – قطن – جهاز الأوتوكليف- ملعقة .

خطوات العمل لتحضير بيئة الآجار المغذي :
1- نوزن الكميات الموضحة أعلاه مع مراعاة الكمية التي نريد تحضيرها.
ولكن حاليا قامت بعض الشركات بتركيب هذه البيئة في عبوة واحدة موضح عليها الكمية التي تلزم لتحضير لتر واحد من البيئة الغذائية.
2- توضع هذه الكمية في دورق مخروطي نظيف .
3- نقيس كمية الماء المقطر اللازمة بواسطة المخبار المدرج ثم نضيفها إلى الدورق .
4- نضع الدورق على اللهب أو باستخدام الحمام المائي للتسخين مع مراعاة التقليب المستمر حتى لاتحترق البيئة ونستمر حتى الغليان ويقصد من هذه العملية تجانس المواد والتأكد من ذوبان الآجار بشكل جيد .
5- نحضر أنابيب اختبار ونملؤها حتى النصف والغرض من ذلك عمل أنابيب الآجار المائل Slant agar بحيث تسند الأنابيب على سطح مرتفع قليلاً بزاوية 45 ْ وتترك لتتصلب.
أو لعمل أنابيب الآجار العميق Deep agar والتي تترك عمودياً في حامل الأنابيب حتى تتصلب – وذلك بعد أن يتم تعقيمها- .
6- نغلق الدورق والأنابيب بسدادات قطنية محكمة ونغطيها بورق القصدير.
1- توضع في الأوتوكليف لمدة 20 دقيقة عند ا2ا ْم للتعقيم ثم نخرجها ونتركها لتبرد للإستخدام أو الإحتفاظ بها لحين الحاجة.

أنابيب الآجار المائل أنابيب الآجار العميق

خطوات العمل لتحضير بيئة المرق المغذي :
1- نوزن الكميات الموضحة أعلاه مع مراعاة الكمية المراد تحضيرها .
2- توضع هذه الكمية في دورق مخروطي نظيف ثم نضيف الماء المقطر مع التأكد من ذوبان المواد المضافة بشكل جيد بالتسخين .
3- نحضر أنابيب اختبار ونملؤها إلى النصف .
4- نغلق الدورق والأنابيب بسدادات قطنية محكمة ونغطيها بورق القصدير.
5- توضع في الأوتوكليف لمدة 20 دقيقة عند ا2ا ْم للتعقيم ثم نخرجها ونتركها لتبرد للإستخدام أو الإحتفاظ بها لحين الحاجة.
ملاحظة : يمكن الرجوع لملحق تحضير الأوساط الغذائية المختلفة لمعرفة التركيب وطريقة التحضير .