الفحوصات التي تتم بالنسبة للعينات التي تؤخذ من الإنسان لفحص الميكروبات
أولاً : الفحوصات البيوكيميائية :
يمكن مراجعة طرق اجراء هذه التجارب في القسم الخاص بفسيولوجيا الكائنات الدقيقة في نفس الكتاب .
1- فحص السكريات : وذلك لدراسة قدرة البكتيريا على تخمر السكر وهذه الخاصية تتميز بها بعض الأنواع عن غيرها منتجة الأحماض أو الغازات .
ويمكن الكشف عنها بوجود كاشف معين يدل على حدوث تغير اللون للوسط الغذائي أو انتاج الغاز كما في بيئة تخمر اللاكتوز وبيئة Macconkey .
2- اختبار الميثيل الأحمر Methyl red test :
يشير هذا الإختبار لوجود التخمر للسكر وإنتاج الحمض من عدمه ويتم إجراءه كما يلي :
تحقن العينة في الوسط Glucose phosphate peptone water .
حضن عند 37 ْم لمدة 48 ساعة ثم يضاف خمس نقاط من الكاشف ويمزج جيداً .
إذا ظهر لون أحمر لامع دل ذلك على حدوث التخمر وإنتاج الحمض وإذا بقي اللون أصفر دل ذلك على عدم حدوث التخمر .
3- Voges-proskauer test :
يجرى هذا الإختبار لمعرفة انتاج مادة Acetyl methyl carbinol وتعمل هذه التجربة مع اختبار Methyl red وتستخدم بيئة Glucose phosphate peptone water .
ويجرى هذا الفحص كما يلي :
ضع البيئة بعد حقنها بالعينة في الحاضنة عند 37 ْم لمدة 48 ساعة .
أضف 1 ملل من 40 % من محلول هيدروكسيد البوتاسيوم و 3 ملل من 5 % من محلول alpha-naphthol مذاب في أثينول مركز .
ظهور لون زهري خلال 2-3 دقائق يدل على أن الإختبار موجب .
4- اختبار تحلل الجيلاتين Gelatin liquefaction .
5- اختبار انتاج كبريتيد الهيدروجين H2S-production .
6- اختبار الإندول Indole test .
7- اختبار إنزيم اليورييز Urease test .
يمكن زراعة العينة على بيئة Christensen`s ثم تحضن عند 37 ْم لمدة 4 ساعات ثم تفحص ثم بعد 24 ساعة ويفضل الإحتفاظ بالعينات المزروعة لمدة 4 أيام قبل التخلص منها .
وعند وجود نتيجة إيجابية يظهر على البيئة لوناً بنفسجياً إلى زهري بسبب تغير لون الكاشف .
8- فحص الكاتاليز Catalase test :
يجرى هذا الفحص على الوسط المزروع بإضافة قطرات من محلول H2O2 أو يؤخذ قليل من النمو ويضاف إلى المحلول فإذا ظهرت فقاعات من الغاز دل ذلك على النتيجة الإيجابية .
9- اختبار الأكسيديز Oxidase test :
عند ظهور النمو على Chocolate agar يضاف 1 مل من محلول مائي من
di-methyl-p-phenylendiamine فعند ظهور لون بنفسجي دل ذلك على النتيجة الإيجابية .
10 – اختبار السترات Citrate test .
11- اختبار اختزال النيترات Nitrate reduction test .
12- اختبار الكواجيوليز Coagulase test :
يستخدم هذا الفحص للتفريق بين أنواع البكتيريا العنقودية الممرضة وغير الممرضة إذ يعتبر انتاج هذا الإنزيم دلالة على وجود بكتيريا Strep.aureus الممرضة .
ويتم إجراء هذا الإختبار بطريقتين :
باستعمال شريحة زجاجية أو باستعمال أنبوب اختبار صغير من خلال اجراء تفاعل بين البكتيريا وبلازما الدم فإذا حدث تخثر للبلازما دل ذلك على أن الإختبار موجب .
نضع 0.5 مل من البلازما المخففة مع 5 مل من معلق البكتيريا المراد فحصها ثم توضع في حضان عند 37 ْم لمدة 30 – 60 دقيقة ثم نلاحظ التخثر .
13 – Quellung test :
يسمى أيضاً Swelling test وذلك بخلط عينة محتوية على بكتيريا Pneumococci مع مصل يحتوي على أجسام مضادة لهذا النوع من البكتيريا على شريحة زجاجية فإن الكبسولة الخاصة بالبكتيريا تنتفخ وتدل على البكتيريا ونوعها .
14- Bile solubility test :
يستخدم هذا الإختبار للكشف عن بكتيريا Pneumococcus التي تذوب في محلول الصفراء ويمكن اجراء هذا الفحص بأخذ نقاط قليلة من محلول Na-desoxycholate مخفف بنسبة 10:1 وتضاف إلى 5 ملل من النمو البكتيري في البيئة السائلة وينتظر لمدة 10 دقائق عند 37 ْم فيصبح النمو صافياً في البيئة دلالة على تحلل هذه البكتيريا .