اختبار الحساسية للمضادات الحيوية باستخدام طريقة , Kirby , Bauer
http://www.vb.dreamjordan.com/photo/2017/146829dreamjor.com.jpg
يستخدم هذا الإختبار في مجال واسع في تطبيقات الأحياء الدقيقة وخاصة الطبية منها وتتم بعدة طرق تهدف جميعها إلى معرفة مدى حساسية النوع البكتيري لمضاد معين أو لتحديد المضاد الحيوي المناسب لاستخدامه كعلاج ضد النوع المسبب للمرض كما سيرد لاحقاً .
خطوات العمل :
خذ طبق به بيئة آجار التحسس Sensitivity agar بسمك 0.4 سم وانشر عليه بكتيريا بمرود قطني معقم تكون من مزرعة نقية غير مختلطة للعينة المرضية تحضر كما يلي .
انقل خمس مستعمرات من النمو النقي إلى إنبوب اختبار يحتوي على 4 مل من Trypticase soy broth و 1 % مستخلص خميرة , ويمكن استخدام هذا الوسط لمعظم أنواع البكتيريا لأنه وسط منشط للنمو .
ضع الأنبوب في الحاضنة لمدة 4 ساعات لإنتاج معلق متوسط العكورة .
تحقن الأطباق بالميكروب المراد فحص الحساسية له باستخدام ماسحة قطنية معقمة وتنشر العينة بشكل جيد شاملة الطبق جميعه . ثم ننتظر لمدة 5 دقائق حتى يجف المعلق على الوسط الغذائي .
خذ أقراص من المضاد الحيوي ( جاهز ) وضع الأقراص موزعة في الطبق بشكل مناسق بواسطة ملقط معقم مع الضغط الخفيف على القرص ليثبت بشكل جيد على سطح الوسط الغذائي .
حضن عند 35 ْم لمدة 24 ساعة .
يتم قياس قطر الحلقات بمسطرة أسفل الطبق علماً أنه إذا كانت القراءة 6 ملم أو أقل يعتبر الكائن غير حساس للمضاد الحيوي .
ملاحظة :
يمكن استخدام الأنواع التالية بحسب مصدر العينة المأخوذة من المريض كما يلي :
عينة الدم والإفرازات والقيح والبلغم والجروح والمخاط يفضل استخدام المضادات التالية : Gentamycin , Tetracyclin , Penicillin , Erythromycin , Cotrimoxazole , Ampicillin , Cephalosporine , Streptomycin .
عينة البول يفضل استخدام الأنواع التالية : Kanamycin , Sulphonamide , Nitrofurantoin , Nalidixic acid , Contrimoxazole , Ampicillin , Tetracyclin , Cephalosporine.
لبكتيريا Staphylococcus تستخدم المضادات : Penicillin , Tetracycline , Lincomycine , Fucidin , Clindamycin , Erythromycin , Contrimoxazole , Gentamycin , Nonobiocin.
الكرويات الأخرى والبكتيريا الموجبة لصبغة جرام : Penicillin , Erythromycin , Contrimoxazole , Cephaloridine , Ampicillin Tetracycline .
العصويات السالبة لصبغة جرام : Streptomycin , Sulphonamide , Contrimoxazole , Cephaloridine , Ampicillin , Kanamycin , Tetracycline , for Salmonella typhi Chloramphenicol .
لبكتيريا Haemophilus : Sulphonamide , Contrimoxazole , Chloramphinicol , Cephaloridine , Ampicillin , Tetracycline.
لبكتيريا Pseudomonas aeroginosa : Carbenicillin , Colistin , Polymyxin B , Gentamycin .
لبكتيريا Clostridia والعصويات اللاهوائية السالبة لصبغة جرام :
Tetracycline , Penicillin , Fusidin , Clindamycin , Ampicillin