التعرف على السبيروكيتات , البكتيريا المنثنية , Spirochaete

تجربة التعرف على السبيروكيتات ( البكتيريا المنثنية ) Spirochaete

بكتيريا رفيعة جداً لدرجة أنها يصعب مشاهدتها بالميكروسكوب الضوئي إلا إذا استعملنا طريقة الحقل المظلم فتظهر بشكل حلزوني واضح Spiral ويصعب صبغ هذه البكتيريا بصبغات الأنيلين المعتادة .
وتتميز باختزالها لنترات الفضة إلى فضة معدنية وتستعمل هذه الظاهرة لصبغها بطريقة فونتانا Fontana , وتتلخص هذه الطريقة بما يلي :

خطوات العمل :
1- حضر معلق من المواد المتحصل عليها من بين قواعد الأسنان بواسطة الكشط بإبرة معقمة . حضر غشاء من المعلق على شريحة نظيفة وانتظر حتى يجف في الهواء .
2- عامل الغشاء ثلاث مرات كل واحدة 30 ثانية بمثبت فونتانا .
3- اغسل المثبت بكحول مطلق واترك الكحول ثلاث دقائق على الغشاء .
4- أزل الزيادة من الكحول بعناية فائقة . اجعل الزيادة من الكحول تجف على اللهب بسرعة
5- ضع معمق فونتانا Fontana´s mordant على الغشاء . سخن حتى يتصاعد البخار وتترك 30 ثانية .
6- اغسل جيداً بماء مقطر ثم اترك الشريحة لتجف .
7- عامل بمحلول فضة الفونتانا وسخن حتى يتصاعد البخار . اترك المحلول 30 ثانية أو حتى يصبح الغشاء بني اللون .
8- اغسل بالماء المقطر ثم جفف في الهواء و حمل في كندا بلسم مع استعمال غطاء شريحة رقيقة ثم افحص بالعدسة الزيتية لتشاهد بكتيريا Treponema microdentium .